Surface Viable Environmental Monitoring and Contact Plate Procedures

訓練模組：表面活菌環境監測與接觸盤程序

1. 學習目標

環境監測（EM）是維持無菌製造環境「受控狀態」的策略性基石。它提供必要的實證數據，以驗證清潔規程與無菌行為確實有效地將微生物風險降至最低。透過量化表面、設備與人員上活菌的存在，EM 充當關鍵的早期預警系統，在污染到達產品之前加以防範。

完成本模組後，受訓人員將能夠：

• 展示 執行表面接觸取樣的正確無菌技術，確保瓊脂表面絕不暴露於落下的微粒之下。
• 執行 採用「滾動動作」的正確現場取樣，以確保活菌最大回收率，同時不損及培養基表面。
• 區分 胰蛋白腖大豆瓊脂（TSA）與Sabouraud 葡萄糖瓊脂（SDA）培養基，依據特定的監測要求（例行對比真菌學）。
• 辨識 當培養盤受損時所需採取的強制性措施，包括重新取樣以及將受損樣本送交實驗室。

達成這些目標對無菌保證至關重要。您以技術精準度執行這些程序的能力，確保我們環境數據的完整性，這直接影響我們保護產品與病人安全的能力。

2. 為何這在現場至關重要

環境監測是我們污染控制策略的基本支柱；它不僅僅是一項文件作業。它是用以評估製造環境健康狀況的關鍵診斷工具。在無菌製造的脈絡中，「那又如何？」的答案很明確：未能準確監測表面可能導致未被偵測到的微生物生長。這可能造成非無菌的產品批次，對病人構成災難性風險，並可能導致產品損失與法規介入。

此程序旨在提供「無菌保證」。透過確實遵循這些步驟，您提供了證據，證明我們的潔淨分級區域維持在所需的微生物限度內。在廠房現場，您是第一道防線；您取樣的精準度確保任何偏離受控狀態的情形都能立即被辨識並補救。

3. 關鍵術語與定義

在 GMP 環境中，精確的術語是「合規的語言」。一致地使用這些術語可確保所有人員——從現場到實驗室——對要求與結果共享一致的理解。

環境監測必備 GMP 詞彙

精通此詞彙是成功執行程序的第一步。

4. 程序逐步說明

成功的環境監測高度仰賴「無菌技術」。以下順序在策略上經過設計，以防止引入外部污染，同時確保樣本準確反映受測表面的潔淨度。

4.1 拆封與準備

1. 取得培養盤： 從冷藏儲存處取出所需數量的接觸盤。
2. 培養基選擇：
   • 選用含卵磷脂與聚山梨醇酯 80 的 TSA 進行例行監測。
   • 選用含卵磷脂與聚山梨醇酯 80 的 SDA 進行真菌學監測。
   • 理由： 不同的微生物需要特定的營養素；選擇正確的培養基可確保我們捕捉到目標污染物。
3. 確認： 檢查有效期限。培養盤在有效期當日（含當日）之前皆為有效。
4. 消毒： 進入潔淨分級區域時，對外部包裝進行消毒。對於雙層／三層包裝的培養盤，移除最外層並將培養盤置於已消毒的容器中。
   • 理由： 這可防止污染物從較低分級區域轉移至較潔淨的環境。
5. 檢查： 目視檢查培養盤。若存在裂縫或缺角等損壞，於使用前標記並丟棄該培養盤。

4.2 現場取樣技術

1. 標示： 在培養盤上標示現場名稱。對於無菌更衣資格認證 或關鍵作業，註明檢測是針對 API 或主要製造，並包含受認證人員的姓名縮寫。
2. 無菌開啟： 以邊緣持握培養盤；以另一隻手移除盤蓋。
   • 理由： 正確的持握位置可防止手指接觸瓊脂。
3. 持握與方向： 在整個取樣過程中，使瓊脂表面朝下。使盤蓋內側朝下。
   • 理由： 這可防止空氣中的微粒沉降於無菌瓊脂或蓋內側。
4. 施作： 以滾動動作 將培養盤輕壓於表面上。
   • 理由： 滾動動作可確保完全接觸。必須避免摩擦，因為它可能損壞瓊脂表面，產生物理人為痕跡或「擴散菌落」，使評估時無法進行 CFU 計數。
5. 受損樣本： 若培養盤受損（例如掉落或取樣時瓊脂表面受損），立即重新取樣該現場。
   • 關鍵規定： 即使培養盤受損，它必須 被保留、記錄，並送交 QC 微生物部門進行培養。通知區域管理層該損壞情形。
6. 封閉： 立即將培養盤蓋回盤蓋。

4.3 取樣後、清潔與裝袋

1. 現場消毒： 以浸有 70% IPA 的非產塵 擦拭巾，採單向、重疊的動作擦拭取樣區域。對於人員，以 70% IPA 噴灑取樣點。
   • 理由： 這可去除培養基殘留物（卵磷脂與聚山梨醇酯 80），否則可能在設備或更衣上助長微生物生長。
2. 培養盤方向： 將培養盤堆疊，使瓊脂表面朝下 且盤蓋在底部。
3. A 級與隔離器要求： 在 A 級區域採集的培養盤必須以無菌袋包裝。對於隔離器培養盤，將堆疊翻轉過來，於其上覆蓋無菌袋，然後將其翻正，使瓊脂維持朝下。
   • 理由： 這可維持「瓊脂朝下」的方向，同時為關鍵環境樣本提供額外的污染屏障。

4.4 培養與評估

培養盤必須於採集後 24 小時內送交 QC 微生物部門並進行培養。

5. 稽核員或檢查員會查看什麼

在 GMP 環境中，黃金法則是：「若未記錄，即未發生。」 衛生主管機關檢查員會尋找清晰、完整不中斷的證據鏈。

稽核目標查核清單

• 培養基完整性： 培養盤是否經檢查有無損壞？是否有丟棄裂縫／缺角培養盤的記錄？
• 可追溯性： 培養盤標籤是否與 LIMS 批號及特定現場相符？
• 更衣記錄： 所有更衣資格認證樣本是否均有人員姓名縮寫？
• 培養合規： 培養是否於 24 小時時限內開始？
• 受損培養盤文件： 若培養盤受損，LIMS 中是否有相應的註記，以及該培養盤仍被送交培養的證據？

6. 常見錯誤及如何避免

環境監測中的錯誤往往是不良習慣的結果。我們將這些視為對專業成長至關重要的「可指導習慣」。

7. 知識測驗

1. 哪一種培養基專門用於真菌學（真菌）監測？
   • A) 含卵磷脂與聚山梨醇酯 80 的 TSA
   • B) 70% IPA
   • C) 含卵磷脂與聚山梨醇酯 80 的 SDA
   • D) LIMS
2. 若培養盤於取樣時受損或受影響，正確的措施為何？
   • A) 丟棄培養盤並略過該現場。
   • B) 重新取樣該現場、記錄損壞，並將受損培養盤送交 QC 進行培養。
   • C) 重新取樣該現場並丟棄受損的培養盤。
   • D) 繼續使用受損培養盤且不重新取樣。
3. 培養盤應以何種方向存放於托盤中？
   • A) 瓊脂表面朝上。
   • B) 瓊脂表面朝下，盤蓋在底部。
   • C) 直立放置。
   • D) 僅 A 級區域才需要方向要求。
4. 簡答題： 為何在程序完成後，必須以 70% IPA 擦拭取樣表面？
5. 簡答題： TSA 培養盤的培養要求（時間與溫度）為何？

答案

1. C （第 4.1 節）
2. B （第 4.2 與 4.4 節）
3. B （第 4.3 節）
4. 答案： 為去除可能在製造設備或更衣上助長微生物生長的培養基殘留物（卵磷脂／聚山梨醇酯 80）（第 4.3 節）。
5. 答案： 於 30 至 35°C 培養 ≥ 72 小時（第 4.4 節）。

8. 工作就緒銜接

此程序是 QC 微生物部門 與 DP-MFG-FACILITY（製造營運） 人員的核心能力。

招募經理期望高水準的「工作就緒度」，其中包括：

• 無菌思維： 持續留意手部位置與培養盤方向，以保護樣本的完整性。
• 注重細節： 為更衣資格認證進行一絲不苟的標示，並仔細檢查培養基。
• 文件完整性： 理解即使是受損樣本也必須加以說明並送交實驗室。

透過精通此 SOP，您確保製造至 QC 的監管鏈保持完整不中斷，維護最高的無菌保證標準。